Влияние пептида GHK-D-Ala на механизмы врожденного иммунитета и процессы перекисного окисления липидов в условиях инфицированной раны

Целью настоящего исследования явилось изучение эффектов пептида GHK-D-Ala на механизмы врожденного иммунитета и процессы перекисного окисления липидов в условиях инфицированной раны.

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на 80 крысах-самцах Вистар. Инфицированную рану моделировали нанесением на спине полнослойной раны и проведением через 24 часа первичной хирургической обработки раны с наложением первичного шва. Пептид Gly-His-Lys-D-Ala (GHK-D-Ala) вводили в дозе 0,5 мкг/кг в область раны каждый день в течение 30 суток. Изучение фагоцитарной активности нейтрофилов крови проводили в спонтанном и стимулированном тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест). Активность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в сыворотке крови оценивали по содержанию малонового диальдегида (МДА) и ацилгидроперекисей (АГП).

Результаты. Введение GHK-D-Ala оказывало положительное влияние в сравнении с контрольной группой как на механизмы фагоцитоза, так и на уровень продуктов ПОЛ. Отмечалось достоверное увеличение НСТ-положительных нейтрофилов в спонтанном тесте на фоне введения пептида на 3-и, 7-е, 10-е и 30-е сутки (p < 0,001), а в стимулированном НСТ-тесте на 3-и, 7-е и 10-е сутки (p < 0,001). Функциональный резерв нейтрофилов был достоверно увеличен к 10-м суткам (p < 0,05), а на 30-е сутки был значимо ниже (p < 0,05). Фагоцитарный индекс и фагоцитарное число были значимо выше на 3-и и 10-е сутки (p˂0,01). Индекс активности фагоцитов достоверно увеличивался на 3-и и 10-е сутки (p < 0,05-0,001). Продемонстрировано достоверное снижение концентрации МДА на 3-и, 7-е, 10-е и 30-е сутки (p < 0,001). Отмечено значимое снижение содержания АГП на 3-и, 7-е, 10-е и 30-е сутки (p < 0,001).

Заключение. Установлено корригирующее влияние пептида Gly-His-Lys-D-Ala на фагоцитарную активность гранулоцитов и процессы перекисного окисления липидов в условиях инфицированной кожной раны.

1. Аралова М.В., Глухов А.А., Остроушко А.П. Кинетика раневого процесса при различных методах стимуляции регенерации в ранах. Вестник экспериментальной и клинической хирургии. 2018;11(3):173-178. DOI: 10.18499/2070-478X-2018-11-3-173-178. URL: https://vestnik-surgery.com/index.php/journal/article/view/1209

2. Гомазков О.А. Нейротрофические факторы мозга: справочно-информационное издание. Электронная версия. Разделы 2-3. Москва: EBEWE Pharma, 2004. с. 89-178

3. Медведев А.Н., Маянский А.Н., Чаленко В.В. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза. Лабораторное дело. 1991;(2):19-20

4. Рагино Ю.И., Душкин М.И. Определение резистентности к окислению гепарин-осажденных b-липопротеинов сыворотки крови у больных ишемической болезнью сердца. Клиническая лабораторная диагностика. 1998;(11):3-5

5. Смахтин М.Ю., Курцева А.А., Чердаков В.Ю. Иммунорегуляторное и гепатотропное действие пептидов Gly-His-Lys, DSLET и АКТГ 4-10. Вестник Уральской медицинской академической науки. 2006;14(3-1):223

6. Морозов А.М., Сергеев А.Н., Сергеев Н.А., Дубатолов Г.А., Рыжова Т.С., Пахомов М.А., Пельтихина О.В. Современные методы стимуляции процесса регенерации послеоперационных ран. Сибирское медицинское обозрение. 2020;(3):54-60. DOI: 10.20333/2500136-2020-3-54-60

7. Хавинсон В.Х. Лекарственные пептидные препараты: прошлое, настоящее, будущее. Клиническая медицина. 2020;98(3):165-177. DOI: 10.30629/0023-2149-2020-98-3-165-177

8. Щербаков В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительности нейтрофилов к стимуляторам. Лабораторное дело. 1989;(1):30-33

9. Siméon A., Monier F., Emonard H., Gillery P., Birembaut P., Hornebeck W., Maquart F.X. Expression and activation of matrix metalloproteinases in wounds: modulation by the tripeptide-copper complex glycyl-L-histidyl-L-lysine-Cu2+. J Invest Dermatol. 1999;112(6):957-964. DOI: 10.1046/j.1523-1747.1999.00606.x

10. Hur G.H., Han S.C., Ryu A.R., Eom Y., Kim J.W., Lee M.Y. Effect of oligoarginine conjugation on the antiwrinkle activity and transdermal delivery of GHK peptide. J Pept Sci. 2020;26(2):e3234. DOI: 10.1002/psc.3234

11. Ahmed M.R., Basha S.H., Gopinath D., Muthusamy R., Jayakumar R. Initial upregulation of growth factors and inflammatory mediators during nerve regeneration in the presence of cell adhesive peptide-incorporated collagen tubes. J Peripher Nerv Syst. 2005;10(1):17-30. DOI: 10.1111/j.1085-9489.2005.10105.x

12. Kazemi A., Frazier T., Cave M. Micronutrient-related neurologic complications following bariatric surgery. Curr Gastroenterol Rep. 2010;12(4):288-295. DOI: 10.1007/s11894-010-0120-5

13. Mazurowska L., Mojski M. Biological activities of selected peptides: skin penetration ability of copper complexes with peptides. J Cosmet Sci. 2008;59(1): 59-69.

14. Pickart L. The human tri-peptide GHK and tissue remodeling. J Biomater Sci Polym Ed. 2008;19(8): 969-988. DOI: 10.1163/156856208784909435

15. Pickart L., Pickart E. A possible mechanism whereby skin remodeling may suppress cancer metastasis genes. Wound Repair and Regeneration. 2011;19(2):A42-A42.

16. Pickart L., Vasquez-Soltero J.M., Margolina A. The human tripeptide GHK-Cu in prevention of oxidative stress and degenerative conditions of aging: implications for cognitive health. Oxid Med Cell Longev. 2012;(2012):324832. DOI: 10.1155/2012/324832

17. Pilgeram L. Control of fibrinogen biosynthesis: role of the FFA/albumin ratio. Cardiovasc Eng. 2010;10(2):78-83. DOI: 10.1007/s10558-010-9092-1

18. Pickart L., Margolina A. Regenerative and Protective Actions of the GHK-Cu Peptide in the Light of the New Gene Data. Int J Mol Sci. 2018 J;19(7):1987. DOI: 10.3390/ijms19071987

19. Pickart L., Vasquez-Soltero J.M., Margolina A. GHK Peptide as a Natural Modulator of Multiple Cellular Pathways in Skin Regeneration. Biomed Res Int. 2015;2015:648108. DOI: 10.1155/2015/648108

20. Siméon A., Emonard H., Hornebeck W., Maquart F.X. The tripeptide-copper complex glycyl-L-histidyl-L-lysine-Cu2+ stimulates matrix metalloproteinase-2 expression by fibroblast cultures. Life Sci. 2000;67(18):2257-2265. DOI: 10.1016/s0024-3205(00)00803-1

21. Pastar I., Stojadinovic O., Yin N.C., Ramirez H., Nusbaum A.G., Sawaya A., Patel S.B., Khalid L. et al. Epithelialization in Wound Healing: A Comprehensive Review. Adv Wound Care (New Rochelle). 2014;3(7):445-464. DOI: 10.1089/wound.2013.0473

22. Rowan M.P., Cancio L.C., Elster E.A., Burmeister D.M., Rose L.F., Natesan S., Chan R.K., Christy R.J. et al. Burn wound healing and treatment: review and advancements. Crit Care. 2015;(19):243. DOI: 10.1186/s13054-015-0961-2