kurskvestЧеловек и его здоровьеHumans and their health1998-57461998-5754Kursk State Medical University10.21626/vestnik/2022-4/15kurskvest-1114Research ArticleФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ НАУКИPHARMACEUTICAL SCIENCESОпределение оптимальных условий экстракции антрагликозидов крушины ломкой коры, разработка и валидация методики их количественного определения методом высокоэффективной жидкостной хроматографииDetermination of the optimal conditions for the extraction of anthraglycosides of alder buckthorn bark, development and validation of a method for their quantitative determination by high performance liquid chromatographyhttps://orcid.org/0000-0001-6907-2983РоманюкАнна АндреевнаRomanyukAnna A.

магистр фарм. наук, ст. преподаватель кафедры организации и экономики фармации с курсом ФПК и ПК, ВГМУ, г. Витебск

M. Sci. (Pharm.), senior lecturer at the Department of organization and economics of pharmacy with the course of FPK and PK, VSMU, Vitebsk, Republic of Belarus

annarkdy@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1241-832XМоисеевДмитрий ВладимировичMoiseevDmitry V.

д-р фарм. наук, доцент, заместитель генерального директора по качеству, ООО «Компания «ДЕКО»», пос. Зеленогорский

Dr. Sci. (Pharm.), Associate Professor, CEO Deputy of quality, LLC «Company «DEKO»», vil. Zelenogorsky, Russian Federation

ussr80@yandex.ruВитебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет (ВГМУ)РоссияVitebsk State Medical University of the Order of Peoples' Friendship (VSMU)Russian FederationООО «Компания «ДЕКО»»РоссияLLC «Company «DEKO»»Russian Federation202230122022254118127Copyright © Романюк А.А., Моисеев Д.В., 20232023Романюк А.А., Моисеев Д.В.Romanyuk A.A., Moiseev D.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.kursk-vestnik.ru/jour/article/view/1114

Цель: оптимизация условий экстракции антрагликозидов крушины ломкой коры, разработка и валидация методики их количественного определения с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии. Материалы и методы. Объектом исследования являлась крушины ломкой кора разных производителей. Работу выполняли на жидкостном хроматографе Agilent 1100 в комплекте с системой подачи и дегазации на четыре растворителя G1311A, диодно-матричным детектором G1315B, термостатом колонок G1316A, устройством для автоматического ввода образцов G1313A. Хроматографический анализ осуществляли на обращенно-фазовой колонке Zorbax SB-C18 (4,6×250 мм, 5 мкм) в градиентном режиме элюирования подвижной фазы, состоящей из ацетонитрила и воды высокоочищенной, доведенной кислотой ортофосфорной до рН 2. Результаты. В результате исследования определены оптимальные условия хроматографического разделения антрагликозидов крушины ломкой коры. Установлены оптимальные условия их экстракции: измельченность растительного сырья - 250 мкм, экстрагент - спирт этиловый 40 %, температура экстракции - 80 ℃, продолжительность экстракции - 90 минут, соотношение сырья и экстрагента - 1:50. Доказано, что разработанная методика количественного определения антрагликозидов крушины ломкой коры является специфичной, линейной, правильной, точной и робастной. Установлена стабильность раствора стандартного образца глюкофрангулина А и полученного экстракта. Заключение. Разработана специфичная методика количественного определения антрагликозидов крушины ломкой коры, которая может быть использована при контроле качества данного вида лекарственного растительного сырья.

Objective: optimization of extraction conditions for anthraglycosides of alder buckthorn bark, development and validation of a method for their quantitative determination using high performance liquid chromatography. Materials and methods. The object of the study was alder buckthorn bark from different manufacturers. The work was performed on an Agilent 1100 liquid chromatograph complete with a G1311A four-solvent supply and degassing system, a G1315B diode array detector, a G1316A column thermostat, and a G1313A automatic sample injection device. Chromatographic analysis was carried out on a Zorbax SB-C18 reverse-phase column (4.6×250 mm, 5 μm) in a gradient elution mode of the mobile phase consisting of acetonitrile and highly purified water, adjusted to pH 2 with phosphoric acid. Results. As a result of the study, the optimal conditions for the chromatographic separation of anthraglycosides of alder buckthorn bark were determined. The optimal conditions for their extraction have been established: the grinding of plant raw materials is 250 µm, the extractant is ethyl alcohol 40%, the extraction temperature is 80℃, the extraction time is 90 minutes, the ratio of raw materials and extractant is 1:50. It has been proved that the developed method for the quantitative determination of anthraglycosides of alder buckthorn bark is specific, linear, correct, accurate and robust. The stability of the solution of the standard sample of glucofrangulin A and the obtained extract was established. Conclusion. A specific method for the quantitative determination of anthraglycosides of alder buckthorn bark has been developed, which can be used in quality control of this type of medicinal plant material.

крушины ломкой кораантрагликозидывысокоэффективная жидкостная хроматографияглюкофрангулин Афрангулин Аalder buckthorn barkanthraglycosideshigh performance liquid chromatographyglucofrangulin Afrangulin AReferencesМуравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия. Москва: Медицина, 2002. 656 с.Murav’yeva D.A., Samylina I.A., Yakovlev G.P. Pharmacognosy. Moscow: Medicine, 2002. 656 p. (in Russ.)Алексеева Г.М., Белодубровская Г.А., Блинова К.Ф., Гончаров М.Ю., Жохова Е.В., Зеленцова А.Б., Маргна У.В., Повыдыш М.Н., др. Фармакогнозия. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Санкт-Петербург: СпецЛит, 2010. 863 с.Alekseyeva G.M., Belodubrovskaya G.A., Blinova K.F., Goncharov M.Yu., Zhokhova E.V., Zelentsova A.B., MargnaU.V., Povydysh M.N., et al. Pharmacognosy. Medicinal raw materials of plant and animal origin. St. Petersburg: SpetsLit, 2010. 863 p. (in Russ.)Roudbaraki, S. J., Nori-Shargh D. Analysis of the volatile constituents of Frangula alnus Mill. from Iran.Russian Chemical Bulletin. 2016;65(11): 2770-2772. DOI: 10.1007/s11172-016-1652-0.Roudbaraki, S. J., Nori-Shargh D. Analysis of the volatile constituents of Frangula alnus Mill. from Iran.Russian Chemical Bulletin. 2016;65(11): 2770-2772. DOI: 10.1007/s11172-016-1652-0.Arsenijevic J., Drobac M., Slavkovska V., Kovacevic N. Anatomical analysis and phytochemical screening of Frangula rupestris (Scop.) Schur (Rhamnaceae). Botanica Serbica. 2018;42(2):231-239. DOI: 10.5281/zenodo.1468339.Arsenijevic J., Drobac M., Slavkovska V., Kovacevic N. Anatomical analysis and phytochemical screening of Frangula rupestris (Scop.) Schur (Rhamnaceae). Botanica Serbica. 2018;42(2):231-239. DOI: 10.5281/zenodo.1468339.Романюк А.А., Моисеев Д.В. Крушины ломкой кора: компонентный состав, фармакологические свойства, стандартизация. Вестник фармации. 2020;2(88):95-104. EDN: XWYMHG.Romanyuk A.A., Moiseyev D.V. Alder buckthorn bark: component composition, pharmacological properties, standardization. Vestnik farmatsii. 2020;2(88):95-104 (in Russ.). EDN: XWYMHG.Bacha A., Jemel I., Moubayed N., Abdelmalek I. Purification and characterization of a newly serine protease inhibitor from Rhamnus frangula with potential for use as therapeutic drug. Journal of Biotech Research. 2017;7(2):1-13. DOI: 10.1007/s13205-017-0764-z.Bacha A., Jemel I., Moubayed N., Abdelmalek I. Purification and characterization of a newly serine protease inhibitor from Rhamnus frangula with potential for use as therapeutic drug. Journal of Biotech Research. 2017;7(2):1-13. DOI: 10.1007/s13205-017-0764-z.Izhaki I. Emodin-a secondary metabolite with multiple ecological function in higher plants. New Phytologist. 2002;155(2):205-217. DOI:10.1046/j.1469-8137.2002.00459.x.Izhaki I. Emodin-a secondary metabolite with multiple ecological function in higher plants. New Phytologist. 2002;155(2):205-217. DOI:10.1046/j.1469-8137.2002.00459.x.Sydiskis R., Owen D., Lohr J., Rosler K., Blomster R. Inactivation of enveloped viruses by anthraquinones extracted from plants. Antimicrobical Agents Chemotherapy. 1991;35(12):2463-2466. DOI: 10.1128/AAC.35.12.2463.Sydiskis R., Owen D., Lohr J., Rosler K., Blomster R. Inactivation of enveloped viruses by anthraquinones extracted from plants. Antimicrobical Agents Chemotherapy. 1991;35(12):2463-2466. DOI: 10.1128/AAC.35.12.2463.Manojlovic N., Solujic S., Sukdolak S., Milosev M. Antifungal activity of Rubia tinctorum, Rhamnus frangula and Caloplaca cerina. Fitoterapia. 2005;76(2):244-246. DOI: 10.1016/j.fitote.2004.12.002.Manojlovic N., Solujic S., Sukdolak S., Milosev M. Antifungal activity of Rubia tinctorum, Rhamnus frangula and Caloplaca cerina. Fitoterapia. 2005;76(2):244-246. DOI: 10.1016/j.fitote.2004.12.002.Abad M., Ansuategi M., Bermejo P. Active antifungal substances from natural sources. Archive for Organic Chemistry. 2007;7:116-145. DOI: 10.3998/ark.5550190.0008.711.Abad M., Ansuategi M., Bermejo P. Active antifungal substances from natural sources. Archive for Organic Chemistry. 2007;7:116-145. DOI: 10.3998/ark.5550190.0008.711.Stef D., Gergen I., Trasca T., Harmanescu M., Lavinia S., Ramona B., Heghedus M. Total antioxidant and radical scavenging capacities for different medicinal herbs. Romanian Biotechnological Letters. 2009;14(5):4704-4707. URL: http://www.rombio.eu/rbl5vol14/12.pdf.Stef D., Gergen I., Trasca T., Harmanescu M., Lavinia S., Ramona B., Heghedus M. Total antioxidant and radical scavenging capacities for different medicinal herbs. Romanian Biotechnological Letters. 2009;14(5):4704-4707. URL: http://www.rombio.eu/rbl5vol14/12.pdf.Марченко С.И., под ред. Государственная фармакопея Республики Беларусь. Том №2. Контроль качества субстанций для фармацевтического использования и лекарственного растительного сырья. Молодечно: Победа, 2016. 1368 с.Marchenko S.I. State Pharmacopoeia of the Republic of Belarus. Volume №2. Quality control of substances for pharmaceutical use and medicinal plant raw materials. Molodechno: Victory, 2016. 1368 p. (in Russ.)Емшинова С.В., Потанина О.Г., Буданова Е.В., Чистяков В.В. Государственная фармакопея Российской Федерации. Том №IV. Москва: Медицина, 2018. 7019 с.Emshinova S.V., Potanina O.G., Budanova E.V., Chistyakov V.V. State Pharmacopoeia of the Russian Federation. VolumeIV. Moscow: Medicine, 2018. 7019 p. (in Russ.)Тулегенова А.У. под ред. Государственная фармакопея Республики Казахстан. Том №3. Астана: Жибекжолы, 2014. 872 с.Tulegenova A.U. State Pharmacopoeia of the Republic of Kazakhstan. Volume No 3. Astana: Zhibekzholy, 2014. 872 p. (in Russ.)Marianne E.K., editor. Eurорeаn Рhаrmаcороeiа:EDQM. 10th Editiоn. URL: https://pheur.edqm.eu/homeMarianne E.K., editor. Eurорeаn Рhаrmаcороeiа:EDQM. 10th Editiоn. URL: https://pheur.edqm.eu/homeРоманюк А.А., Моисеев Д.В. Оптимизация условий экстракции франгулина А в крушины ломкой коре методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Вестник Башкирского государственного медицинского университета. 2019;(4):291-295. EDN: QUXDIR.Romanyuk A.A., Moiseyev D.V. Optimization of conditions for extraction of frangulin A into adler buckthorn brittle by high performance liquid chromatography. Vestnik Bashkirskogo gosudarstvennogo meditsinskogo universiteta. 2019;(4):291-295 (in Russ.). EDN: QUXDIR.Шеряков А.А, под ред. Государственная фармакопея Республики Беларусь. Том №1. Общие методы контроля качества лекарственных средств. Молодечно: Победа, 2012. 1220 с.Sheryakov A.A. State Pharmacopoeia of the Republic of Belarus. Volume №1. General methods of drug quality control. Molodechno: Victory, 2012.1220 p. (in Russ.)Самылина И.А., Моисеев Д.В., Марченко С.И., Веремчук О.А., Моисеева А.М., Сорокина А.А. Гармонизация методических подходов к стандартизации фармакопейных видов растительного сырья, содержащего флавоноиды. Фармация. 2020;5(69):5-11. DOI: 10.29296/25419218-2020-05-01. EDN: PLLZEG.Samylina I.A., Moiseyev D.V., Marchenko S.I., Veremchuk O.A., Moiseyeva A.M., Sorokina A.A. Harmonization of methodological approaches to the standardization of pharmacopoeial types of plant materials containing flavonoids. Pharmacy. 2020;5(69):5-11 (in Russ.). DOI: 10.29296/25419218-2020-05-01. EDN: PLLZEG.Эпштейн Н.А., Севастьянова В.Л., Королева А.И. Исследование робастности при валидации методик ВЭЖХ и УЭЖХ: современный подход, включающий анализ рисков. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2018;4:96-109. EDN: VYLMKT.Epshteyn N.A., Sevast’yanova V.L., Koroleva A.I. Robustness study in the validation of HPLC and UPLC methods: a modern approach including risk analysis. Drug development and registration. 2018;4:96-109 (in Russ.). EDN: VYLMKT.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.